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技术知识 |
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| 高效液相色谱仪的使用注意事项及维护 |
| 来源:西安西德仪器仪表有限公司 日期:2025-3-24 |
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高效液相色谱仪（HPLC）是一种重要的分析仪器，广泛应用于化学、制药、环境等领域。正确的使用和维护对于保证分析结果的准确性、延长仪器使用寿命至关重要。以下是使用注意事项及维护方法：
使用前的准备
流动相准备：使用高纯度的溶剂，如色谱纯或更高纯度级别，确保流动相的质量。水相需使用超纯水，并通过 0.45μm 或更小孔径的滤膜过滤，以去除杂质。有机相也应过滤。流动相使用前需进行脱气处理，可采用在线脱气机、超声脱气（15-30 分钟）等方法，防止气泡进入系统影响分析结果。
样品准备：确保样品完全溶解且无固体颗粒，使用 0.45μm 或更小孔径的滤膜过滤样品，防止堵塞色谱柱和流路系统。如果样品浓度过高，需进行适当稀释，以避免进样量过大导致色谱峰变形或过载。
使用过程中的注意事项
系统压力：密切关注系统压力，避免压力过高或过低。压力过高可能是由于色谱柱堵塞、流动相粘度大或流速过快等原因导致；压力过低可能是由于流动相泄漏、泵故障或进样器问题等引起。在改变流动相组成或流速时，应缓慢进行，以防止压力波动过大对系统造成损害。
流速控制：按照色谱柱的使用说明设置合适的流速，避免流速过高损坏色谱柱或导致分离效果不佳。在更换色谱柱或流动相后，应重新调整流速并进行系统平衡。
温度控制：如果需要控制柱温，应根据色谱柱的要求设置合适的温度。温度变化可能会影响色谱峰的保留时间和分离效果，因此在分析过程中应保持柱温稳定。
进样操作：进样前确保进样器干净，避免交叉污染。按照进样器的操作说明进行进样，注意进样量的准确性。进样后及时清洗进样器，防止残留样品对后续分析产生影响。
使用后的维护
色谱柱维护：分析结束后，需对色谱柱进行冲洗。如果使用的是反相色谱柱，通常先用高比例水相（如 90% 水 - 10% 有机相）冲洗 30 分钟以上，以去除缓冲盐和杂质，然后用高比例有机相（如 90% 有机相 - 10% 水相）冲洗 30 分钟以上，最后用纯有机相冲洗并保存。对于正相色谱柱，应使用相应的正相溶剂进行冲洗和保存。
流路系统清洗：用合适的溶剂冲洗整个流路系统，去除残留的样品和流动相。如果使用了缓冲盐，应先用高比例水相冲洗系统，确保缓冲盐完全清除，防止盐结晶堵塞流路。
泵的维护：定期检查泵的密封性能，如有泄漏应及时更换密封件。泵的活塞和密封圈需要定期清洗和润滑，以保证泵的正常运行。
检测器维护：根据检测器的类型进行相应的维护。如紫外检测器，需定期清洗流通池，检查灯的寿命，及时更换老化的灯。
高效液相色谱仪的使用和维护需要严格按照操作规程进行，定期进行检查和保养，及时处理出现的问题，以确保仪器的性能和分析结果的可靠性。
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