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技术知识 |
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| 分光光度计的基本工作原理是什么？ |
| 来源:西安西德仪器仪表有限公司 日期:2025-3-25 |
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分光光度计的基本工作原理是基于物质对光的吸收特性，遵循朗伯 - 比尔定律，具体内容如下：
光源产生复合光：分光光度计的光源能发出包含多种波长的复合光。常见的光源有钨灯（用于可见光区，波长范围约 350 - 1000nm）和氘灯（用于紫外光区，波长范围约 190 - 380nm） 。例如在测定可见光区物质的吸光度时，钨灯发出连续的可见光，为后续的分光和吸收测量提供基础光源。
分光系统分离出单色光：复合光通过分光系统（如棱镜或光栅）后，不同波长的光因折射或衍射角度不同而被分离，从而获得特定波长的单色光。以光栅分光为例，光栅上有许多平行的刻线，复合光照射到光栅上时，不同波长的光会在不同的方向上产生衍射，通过调整角度可以选取所需波长的单色光。
单色光照射样品：分离出的单色光通过样品池照射到样品上。样品中的物质分子会吸收特定波长的光，吸收的程度取决于物质的浓度、分子结构以及光程等因素。比如，含有特定发色团的有机化合物会吸收特定波长的紫外或可见光，使得透过样品的光强度减弱。
检测光强度并转换为电信号：透过样品的光到达检测器（如光电管、光电倍增管等），检测器将光强度转换为电信号。光强度越强，产生的电信号越大；反之，电信号越小。例如光电倍增管可以将微弱的光信号放大并转换为较大的电信号，便于后续的测量和处理。
依据朗伯 - 比尔定律计算吸光度：朗伯 - 比尔定律表明，物质对光的吸收程度（吸光度 A）与物质的浓度（c）、液层厚度（b，即光程）成正比，公式为
A=εbc
，其中
ε
为摩尔吸光系数（与物质的性质和光的波长有关）。通过测量透过样品前后光强度的变化，计算出吸光度，进而可以根据已知的标准曲线或公式，确定样品中待测物质的浓度。
分光光度计通过以上一系列过程，实现对物质的定性和定量分析，在化学、生物学、医学、环境科学等众多领域有着广泛的应用。
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